ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
市面上ELISA試劑盒廠家眾多,質(zhì)量也層次不齊,挑選ELISA試劑盒成為大家重視的重點(diǎn)問題。下面我司就怎么挑選ELISA試劑盒從幾個點(diǎn)來分析。
一、特異性
ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分,抗體對有關(guān)。若抗體對中為多抗,另一個有必要為單抗,建議運(yùn)用雙單抗。挑選一個好的ELISA試劑盒,咱們首先要考慮的就是特異性。
二、靈敏度
ELISA試劑盒的好壞往往就取決于靈明度的高低,因而靈敏度也是咱們挑選ELISA試劑盒的一個重要技術(shù)參數(shù)。靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的才能,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選合適的試劑盒,假如待檢目標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可挑選高敏的 ELISA 試劑盒。
三、重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講究重復(fù)性,一般 ELISA 試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 15% 以內(nèi)。
操作中應(yīng)留神的5個方面:
1. 跟著病況的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖,因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。間接法測定中,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。
2. 加樣一般運(yùn)用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手藝檢測中,還應(yīng)留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導(dǎo)致過錯效果或定量不準(zhǔn)。
4. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實(shí)驗(yàn)勝敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的免疫反響物,間斷抗原抗體反響,除掉標(biāo)本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。
5. 斷定效果須運(yùn)用ELISA試劑盒測讀儀,比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。酶標(biāo)儀具有杰出的重復(fù)性。